A IMPORTANCIA DA PCR DUPLA NA ELUCIDAÇAO DOS CASOS COM SOROLOGIA DUVIDOSA PARA DOENÇA DE CHAGAS(especial para SIIC © Derechos reservados) |
A detecção do T. cruzi pela PCR (reação em cadeia da polimerase) em pacientes, tem sido descrita e utilizada em alguns pólos da América Latina, demonstrando ser uma técnica sensível e específica, pois amplifica seqüências alvo do DNA do parasita. |
Autor: Gláucia eliset Barbosa marcon, Columnista Experto de SIIC Institución: Faculdade De Ciências Médicas UNICAMP São Paulo, Brasil Artículos publicados por Gláucia eliset Barbosa marcon, |
Coautor Sandra Cecília Botelho Costa – Professora Dou* * |
Recepción del artículo 26 de Marzo, 2004 |
Primera edición 24 de Agosto, 2004 |
Segunda edición, ampliada y corregida 7 de Junio, 2021 |
Resumen
A doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, afeta cerca de 16 milhões de pessoas na América Latina. Geralmente é diagnosticada utilizando-se métodos sorológicos, não existindo, entretanto, um padrão ouro para o diagnóstico da enfermidade. As técnicas rotineiramente utilizadas para tal diagnóstico são o ELISA (enzime linked immunosorbent assay), a imunofluorescência e a hemaglutinação. Para um paciente ser considerado positivo, deve haver concordância entre as duas sorologias utilizadas. Caso uma das sorologias seja negativa ou limítrofe ao cut-off utilizado, esta é considerada duvidosa, ou seja, não há certeza da infecção pelo T. cruzi. O inquérito epidemiológico, nesses casos é importante, mas não esclarece a presença da infecção, especialmente nos casos crônicos, que apresentem forma indeterminada, sem sintomatologia ou alterações eletrocardiográficas. A detecção do T. cruzi pela PCR (reação em cadeia da polimerase) em pacientes, tem sido descrita e utilizada em alguns pólos da América Latina, demonstrando ser uma técnica sensível e específica, pois amplifica seqüências alvo do DNA do parasita. Este trabalho teve como objetivo principal, demonstrar a eficácia da PCR dupla para o esclarecimento dos casos duvidosos quanto à doença de Chagas. Para tal teste, foi utilizado um fragmento repetitivo do DNA nuclear, que apresenta regiões conservadas para o anelamento de iniciadores na primeira e segunda reação da PCR.
Palabras clave
Reação em cadeia da polimerase (PCR), Trypanosoma cruzi, doença de Chagas, PCR dupla, diagnóstico molecular
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