OBTENCION DE UN TRAZADOR 35S-PROINSULINA Y SU APLICACION EN UN ENSAYO RADIOMETRICO COMBINADO PARA PREDECIR EL REQUERIMIENTO DE INSULINA EN PACIENTES DIABETICOS ADULTOS(especial para SIIC © Derechos reservados) |
El nuevo trazador es apto para su empleo en el método radiométrico combinado, ya que permite la detección simultánea de los marcadores GADA y PAA. |
Autor: Silvina n. Valdez Columnista Experto de SIIC Institución: Facultad de Farmacia y Bioquímica Universidad de Buenos Aires Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU, CONICET-UBA) Artículos publicados por Silvina n. Valdez |
Coautores Anabel Villalba* Ruben F. Iacono** Edgardo Poskus*** Bioquímica UBA. Docente auxiliar FFyB, UBA; Becaria de Doctorado, UBA* Doctor UBA. Docente auxiliar FFyB, UBA; Profesional Principal CONICET** Doctor en Bioquímica UBA. Profesor Regular Titular de la Cátedra de Inmunología, FFyB, UBA; Investigador Principal CONICET; Director Interino del Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU,*** |
Recepción del artículo 12 de Abril, 2005 |
Aprobación 3 de Mayo, 2005 |
Primera edición 29 de Noviembre, 2005 |
Segunda edición, ampliada y corregida 7 de Junio, 2021 |
Resumen
Los autoanticuerpos anti-glutamato descarboxilasa (GADA) y anti-insulina/proinsulina (IAA/PAA) circulantes tienen valor predictivo del requerimiento insulínico en pacientes diabéticos con comienzo clínico en la edad adulta. En nuestro laboratorio se desarrolló preliminarmente un nuevo trazador 35S-Proinsulina para la determinación de PAA. Posteriormente, se lo utilizó en un ensayo de unión de radioligando combinado con el trazador 35S-GAD para la determinación simultánea de GADA y PAA (RBA GADA/PAA combi). El ensayo combinado se aplicó a 85 sueros provenientes de pacientes infantojuveniles con diabetes tipo 1, a 98 pacientes con comienzo clínico en edad adulta y a 53 controles normales. El 100% de los pacientes con diabetes tipo 1 con al menos un marcador positivo y el 17.7% de los que eran negativos para ambos marcadores fueron positivos por el RBA GADA/PAA combi. El 100% de los pacientes adultos PAA+ (GADA+ o GADA-), el 92.3% de los pacientes GADA+/PAA- y el 1.3% de los pacientes GADA-/PAA- fueron RBA GADA/PAA combi+. El 88.9% de los pacientes adultos RBA GADA/PAA combi+ evolucionaron a requerimiento insulínico. En conclusión, el nuevo trazador 35S-Proinsulina fue apto para su utilización en el método radiométrico combinado, permitiendo la detección simultánea de los marcadores GADA y PAA. El RBA GADA/PAA combi es una herramienta valiosa para detectar procesos autoinmunes asociados a un futuro requerimiento insulínico, en pacientes diabéticos adultos.
Palabras clave
Autoanticuerpos, diabetes mellitus, insulina, proinsulina, GAD, ensayo de unión de radioligando
Abstract
The serum glutamate decarboxylase autoantibodies (GADA) and insulin/proinsulin autoantibodies (IAA/PAA) have predictive value about the insulin requirement in adult-onset diabetic patients. In our lab, we first developed a new tracer 35S-Proinsulin for PAA assessment. Then it was employed in a combined radioligand binding assay with 35S-GAD for the simultaneous determination of GADA and PAA (RBA GADA/PAA combi). This novel assay was applied to sera from 85 young type 1 and 98 adult-onset diabetic patients, and to 53 normal control. Among type 1 diabetes sera, 100% of those with at least one positive marker by single methods, and 17.7% of those with double negative markers, were positive by RBA GADA/PAA combi. Among sera from adult-onset diabetes, 100% of those PAA+ (GADA+ or GADA-), 92.3% of GADA+/PAA-, and 1.3% of GADA-/PAA-, were RBA GADA/PAA combi+. Moreover, 88.9% of adult patients RBA GADA/PAA combi+ evolved to insulin requirement, suggesting a good predictive value for this method. In conclusion, the new tracer 35S-Proinsulin was able to be used in the RBA GADA/PAA combi allowing the simultaneous detection of GADA and PAA markers. Such marker combination is a valuable tool for assessing autoimmune processes associated to future insulin requirement in adult-onset diabetes.
Key words
Autoantibodies, diabetes mellitus, insulin, proinsulin, GAD, radioligand-binding assay
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