NUEVAS APLICACIONES DEL ENSAYO COLORIMETRICO PARA DETECTAR ANTICUERPOS BACTERICIDAS CONTRA LOS SEROGRUPOS B Y C DE NEISSERIA MENINGITIDIS(especial para SIIC © Derechos reservados) |
El ensayo bactericida del suero colorimétrico mostró ser muy útil en la identificación de fuentes de complemento, permitiendo además el uso de suero liofilizado como complemento lo cual constituye una ventaja importante para este tipo de ensayo. |
Autor: Tamara Rodríguez ramírez, Columnista Experto de SIIC Institución: Instituto Finlay Habana, Cuba Artículos publicados por Tamara Rodríguez ramírez, |
Coautores Miriam Lastre González* Bárbara Cedre Marrero** Oliver Pérez Martín*** Doctora en Medicina. Instituto Finlay* Maestra en Ciencias Biológicas. Instituto Finaly** Doctor en Medicina y Doctor en Ciencias. Instituto Finlay*** |
Recepción del artículo 14 de Abril, 2004 |
Primera edición 6 de Agosto, 2004 |
Segunda edición, ampliada y corregida 7 de Junio, 2021 |
Resumen
El ensayo bactericida del suero colorimétrico (EBSc) expone bacterias vivas (Neisseria meningitidis) a la acción de anticuerpos en presencia de complemento, lo que trae como consecuencia la lisis bacteriana. La posterior adición de un medio de cultivo que contiene glucosa y un indicador de pH permite la detección de los títulos de anticuerpos bactericidas visualmente y por espectrofotometría. Este ensayo, previamente estandarizado y validado, es ahora aplicado al tamizaje de sueros como fuente de complemento, lo que permite la evaluación de un gran número de muestras y una fácil identificación de los candidatos. Además, se compararon dos formas de conservar el complemento (congelado a -70oC o liofilizado). Para ello, se evaluaron diez muestras de título conocido obteniéndose para cada una el título esperado o ± 1 dilución al ser evaluadas con el complemento conservado por congelación o por liofilización. En conclusión, el EBSc mostró ser muy útil en la identificación de fuentes de complemento, permitiendo además el uso de suero liofilizado como complemento lo cual constituye una ventaja importante para este tipo de ensayo.
Palabras clave
Anticuerpos bactericidas, Neisseria meningitidis, fuentes de complemento
Abstract
Colorimetric serum bactericidal assay (cSBA) expose live bacteria (Neisseria meningitidis) to the action of antibodies in the presence of complement producing bacterial lisis. Subsequent addition of a culture medium containing glucose and a pH indicator allows the titer detection either visual or spectrophotometrically. This assay previously standardized and validated is now applied to the screening of sera as complement sources allowing the evaluation of a large number of samples and an easy identification of candidates. Moreover, two ways to store complement (freezing at -70o C and lyophilization) were compared. Ten samples were evaluated obtaining the titer (previously known) or ± 1 dilution for each one when were titrated with the complement either frozen or freeze-dried. Conclusions: cSBA showed to be very useful to identfy complement sources, allowing also the use of freeze-dried complement which is an important advantage for this kind of assay.
Key words
Bactericidal activity, Neisseria meningitidis, complement sources
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