mayores que los hallados en pacientes que parieron a término (grupos A y . También fueron significativamente mayores en las pacientes con RPM y parto pretérmino seguida de parto prematuro (grupo D) que en las que parieron a término. Estos resultados sugieren que la elevación de nitrato/nitrito en secreciones vaginales se acompaña de RPM y precede al parto prematuro. En cambio, no hubo diferencia significativa entre los grupos en la frecuencia de cultivos positivos de secreción vaginal al momento de la toma de muestra. (INSERTAR LA FIGURA 1)Figura 1. Concentración de nitrito/nitrato en secreción vaginal de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Las barras representan el valor medio. Significación estadística: grupo A vs. C, p < 0.0005; grupo A vs. D, p < 0.0001; grupo B vs. C, p < 0.003; grupo B vs. D, p < 0.0001.El recuento leucocitario y los niveles de proteína C reactiva en sangre periférica de las mujeres con RPM y parto pretérmino eran significativamente mayores que los hallados en las pacientes con parto a término (figuras 2 y 3). En las mujeres del grupo C, sin embargo, estos parámetros no predijeron el parto prematuro. La concentración de nitrato/nitrito en las muestras fue determinada por tratamiento con nitrato reductasa seguida de reacción de Griess en microplacas de 96 pocillos.7 La medición de nitrato/nitrito sólo requiere mezclar los reactivos, demanda menos de 30 minutos y cuesta menos de 1 dólar por ensayo. Sin embargo, requiere de lector de microplacas y de una técnica de laboratorio. Un ensayo semicuantitativo simple para ser realizado al lado de la cama de la paciente podría resultar útil.(INSERTAR LA FIGURA 2)Figura 2. Leucocitos en sangre periférica de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Los valores se expresan como media ± desvío estándar.(INSERTAR LA FIGURA 3)Figura 3. Proteína C reactiva en suero de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Los valores se expresan como media ± desvío estándar.Posibles papeles del ON en el daño placentario y la maduración cervical 10-14 y nosotros hemos detectado inmunorreactividad para esta enzima en sinciciotrofoblastos de la placenta de mujeres con embarazo normal.7 En condiciones fisiológicas, el ON derivado de los trofoblastos puede prevenir la adhesión de plaquetas y leucocitos a la superficie del sinciciotrofoblasto en el espacio intervelloso, y de esta manera mantener la microcirculación. También puede afectar al metabolismo del ácido araquidónico15 y a los citocromos P450,16 y regular las funciones placentarias. No se observa diferencia significativa de inmunorreactividad para ONS endotelial entre la plancenta de un embarazo normal y la de la corioamnionitis, pero en este último caso existe un aumento de la inmunorreactividad para la ONS inducible. La existencia de ONS inducible en la placenta humana ha sido informada con anterioridad.14,17,18 Los niveles de esta enzima en el homogenato de placenta de pacientes con corioamnionitis son unas 3.2 veces superiores a los hallados en placentas de embarazos normales.7 La ONS inducible fue localizada en los sinciciotrofoblastos y las células de Hofbauer en la placenta de mujeres con corioamnionitis o abrupción placentaria, pero los niveles fueron bajos en la placenta normal.7 El LPS bacteriano, la interleuquina-1ß y el factor Ó de necrosis tumoral, que están elevados en el líquido amniótico de las pacientes con corioamnionitis,19 estimulan la formación de ON en varios tipos celulares.20 La sobreproducción de ON o peroxinitrito puede producir daño placentario, ruptura de membranas y maduración cervical. El peroxinitrito causa modificación proteica, peroxidación lipídica y daño al ADN.6 Una de las características del daño celular por ON o peroxinitrito es la apoptosis.7 Hemos hallado que la sobreproducción de ON y peroxinitrito y el aumento de apoptosis en la placenta son habituales tanto en la corioamnionitis como en la abrupción placentaria.7 Aunque el disparador inicial de esta muerte celular puede ser multifactorial, parece existir una cascada común de muerte celular y daño tisular en ambas patologías. Se ha demostrado que el ON está involucrado en la activación de las MPM, las cuales degradan proteínas de la matriz extracelular, en varios tipos celulares tales como condrocitos humanos,21 células mesangiales de rata,22 neutrófilos humanos23 y plaquetas humanas.24 Hemos demostrado que el ON está involucrado en la activación de las MPM y la inducción de la apoptosis en trofoblastos tratados con LPS.25 Dado que la administración vaginal de un donante de ON induce maduración cervical,26 la sobreproducción de ON podría estar involucrada en el mecanismo patológico del parto prematuro, presumiblemente por inducción de las MPM y la apoptosis en el cérvix uterino. La sobreproducción de ON podría no sólo ser un marcador predictivo sino también estar involucrada en la maduración cervical, la fragilidad de las membranas y el consiguiente parto prematuro.Aunque los antibióticos se utilizan clínicamente en la actualidad para tratar a los pacientes con corioamnionitis, no siempre son eficaces una vez que el LPS es liberado desde la pared de las bacterias. Aun luego de la eliminación de la bacteria pueden producirse cambios tisulares tales como ruptura de las membranas amnióticas, daño placentario y maduración cervical. El lavado y desinfección de la vagina de pacientes con infección local podría ser eficaz para reducir la cantidad de LPS y de citoquinas inflamatorias y prevenir el parto prematuro. Más aún, los inhibidores de las ON sintetasas o los inhibidores de la proteasa podrían constituir agentes terapéuticos novedosos para estas enfermedades. Bibliografía pretérmino y posterior parto prematuro (grupo fueron significativamente mayores que los hallados en pacientes que parieron a término (grupos A y B). También fueron significativamente mayores en las pacientes con RPM y parto pretérmino seguida de parto prematuro (grupo D) que en las que parieron a término. Estos resultados sugieren que la elevación de nitrato/nitrito en secreciones vaginales se acompaña de RPM y precede al parto prematuro. En cambio, no hubo diferencia significativa entre los grupos en la frecuencia de cultivos positivos de secreción vaginal al momento de la toma de muestra. (INSERTAR LA FIGURA 1)Figura 1. Concentración de nitrito/nitrato en secreción vaginal de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Las barras representan el valor medio. Significación estadística: grupo A vs. C, p < 0.0005; grupo A vs. D, p < 0.0001; grupo B vs. C, p < 0.003; grupo B vs. D, p < 0.0001.El recuento leucocitario y los niveles de proteína C reactiva en sangre periférica de las mujeres con RPM y parto pretérmino eran significativamente mayores que los hallados en las pacientes con parto a término (figuras 2 y 3). En las mujeres del grupo C, sin embargo, estos parámetros no predijeron el parto prematuro. La concentración de nitrato/nitrito en las muestras fue determinada por tratamiento con nitrato reductasa seguida de reacción de Griess en microplacas de 96 pocillos.7 La medición de nitrato/nitrito sólo requiere mezclar los reactivos, demanda menos de 30 minutos y cuesta menos de 1 dólar por ensayo. Sin embargo, requiere de lector de microplacas y de una técnica de laboratorio. Un ensayo semicuantitativo simple para ser realizado al lado de la cama de la paciente podría resultar útil.(INSERTAR LA FIGURA 2)Figura 2. Leucocitos en sangre periférica de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Los valores se expresan como media ± desvío estándar.(INSERTAR LA FIGURA 3)Figura 3. Proteína C reactiva en suero de mujeres embarazadas con complicaciones pretérmino o sin ellas. Los valores se expresan como media ± desvío estándar.Posibles papeles del ON en el daño placentario y la maduración cervical 10-14 y nosotros hemos detectado inmunorreactividad para esta enzima en sinciciotrofoblastos de la placenta de mujeres con embarazo normal.7 En condiciones fisiológicas, el ON derivado de los trofoblastos puede prevenir la adhesión de plaquetas y leucocitos a la superficie del sinciciotrofoblasto en el espacio intervelloso, y de esta manera mantener la microcirculación. También puede afectar al metabolismo del ácido araquidónico15 y a los citocromos P450,16 y regular las funciones placentarias. No se observa diferencia significativa de inmunorreactividad para ONS endotelial entre la plancenta de un embarazo normal y la de la corioamnionitis, pero en este último caso existe un aumento de la inmunorreactividad para la ONS inducible. La existencia de ONS inducible en la placenta humana ha sido informada con anterioridad.14,17,18 Los niveles de esta enzima en el homogenato de placenta de pacientes con corioamnionitis son unas 3.2 veces superiores a los hallados en placentas de embarazos normales.7 La ONS inducible fue localizada en los sinciciotrofoblastos y las células de Hofbauer en la placenta de mujeres con corioamnionitis o abrupción placentaria, pero los niveles fueron bajos en la placenta normal.7 El LPS bacteriano, la interleuquina-1ß y el factor Ó de necrosis tumoral, que están elevados en el líquido amniótico de las pacientes con corioamnionitis,19 estimulan la formación de ON en varios tipos celulares.20 La sobreproducción de ON o peroxinitrito puede producir daño placentario, ruptura de membranas y maduración cervical. El peroxinitrito causa modificación proteica, peroxidación lipídica y daño al ADN.6 Una de las características del daño celular por ON o peroxinitrito es la apoptosis.7 Hemos hallado que la sobreproducción de ON y peroxinitrito y el aumento de apoptosis en la placenta son habituales tanto en la corioamnionitis como en la abrupción placentaria.7 Aunque el disparador inicial de esta muerte celular puede ser multifactorial, parece existir una cascada común de muerte celular y daño tisular en ambas patologías. Se ha demostrado que el ON está involucrado en la activación de las MPM, las cuales degradan proteínas de la matriz extracelular, en varios tipos celulares tales como condrocitos humanos,21 células mesangiales de rata,22 neutrófilos humanos23 y plaquetas humanas.24 Hemos demostrado que el ON está involucrado en la activación de las MPM y la inducción de la apoptosis en trofoblastos tratados con LPS.25 Dado que la administración vaginal de un donante de ON induce maduración cervical,26 la sobreproducción de ON podría estar involucrada en el mecanismo patológico del parto prematuro, presumiblemente por inducción de las MPM y la apoptosis en el cérvix uterino. La sobreproducción de ON podría no sólo ser un marcador predictivo sino también estar involucrada en la maduración cervical, la fragilidad de las membranas y el consiguiente parto prematuro.Aunque los antibióticos se utilizan clínicamente en la actualidad para tratar a los pacientes con corioamnionitis, no siempre son eficaces una vez que el LPS es liberado desde la pared de las bacterias. Aun luego de la eliminación de la bacteria pueden producirse cambios tisulares tales como ruptura de las membranas amnióticas, daño placentario y maduración cervical. El lavado y desinfección de la vagina de pacientes con infección local podría ser eficaz para reducir la cantidad de LPS y de citoquinas inflamatorias y prevenir el parto prematuro. Más aún, los inhibidores de las ON sintetasas o los inhibidores de la proteasa podrían constituir agentes terapéuticos novedosos para estas enfermedades. Bibliografía oxide. Lancaster, J. Jr. (ed) Nitric oxide: principles and actions. 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