Resumen
Evaluamos la factibilidad de la tipificación genética del sexo fetal así como de su condición RhD y RhCE mediante el análisis con PCR en tiempo real del ADN fetal extraído de muestras de plasma materno. Entre las semanas 10 y 22 de gestación determinamos el sexo fetal en 39 embarazos cuyos fetos estaban en riesgo de padecer trastornos ligados al cromosoma X; correlacionamos nuestros hallazgos con los resultados obtenidos mediante el análisis de muestras de las vellosidades coriónicas y con los de la amniocentesis, o bien verificamos los datos luego del parto. El análisis en plasma materno del gen SRY (región determinante del sexo en el cromosoma Y) mediante PCR en tiempo real estuvo en completa concordancia con el sexo fetal determinado en las 39 mujeres, cuyos embarazos correspondían a 18 varones y 21 niñas. Analizamos 45 mujeres embarazadas negativas para RhD entre las semanas 11 y 40 de gestación y correlacionamos los resultados con el análisis serológico del cordón umbilical luego del parto. La tipificación genética del exón 7 del RhD, del exón 10 del RhD, del exón 2 del RhCE (alelo C) y del exón 5 del RhCE (alelo E) fetales mediante el análisis no invasivo de muestras del plasma materno se llevó a cabo correctamente en 45/45 mujeres embarazadas negativas para RhD, que posteriormente dieron a luz 24 recién nacidos RhD positivos, 17 RhC positivoas y 7 neonatos RhE positivos. Sugerimos que la amplificación del ADN fetal libre en el plasma materno es un enfoque promisorio para la determinación válida y rápida del sexo fetal así como de su condición RhD y RhCE. Recomendamos realizar tipificación genética no invasiva del RhD y RhCE fetal en las embarazadas negativas para RhD aloinmunizadas para estimar su riesgo de enfermedad hemolítica del recién nacido y determinación del sexo fetal en los embarazos con riesgo de presentar trastornos ligados a X; en estos últimos casos, sugerimos que la práctica de procedimientos diagnósticos invasivos quede restringida exclusivamente a los fetos masculinos.

Palabras clave
ADN fetal, plasma materno, PCR en tiempo real, enfermedad hemolítica del recién nacido, trastornos ligados a X

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(castellano)
Extensión:  +/-5.25 páginas impresas en papel A4
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Abstract
We assessed the feasibility of fetal sex, RhD and RhCE genotyping by analysis of DNA extracted from maternal plasma samples by using real-time PCR. We determined fetal sex in 39 pregnancies at risk of X-linked disorders from 10^th to 22^nd weeks of gestation and correlated with the results of chorionic villus sampling and amniocentesis or checked after the delivery. SRY real-time PCR analysis of maternal plasma was in complete concordance with fetal sex in all 39 tested pregnant women bearing 18 males and 21 females. We analysed 45 Rh D negative pregnant women within 11^th and 40^th week of pregnancy and correlated the results with serological analysis of cord blood after the delivery. Non-invasive prenatal fetal RhD exon 7, RhD exon 10, RhCE exon 2 (C allele) and RhCE exon 5 (E allele) genotyping analysis of maternal plasma samples was well performed in 45/45 Rh D negative pregnant women delivering 24 Rh D, 17 Rh C and 7 Rh E positive newborns. We suggest that amplification of free fetal DNA in maternal plasma is a promising approach for a valid and rapid fetal sex, RhD and RhCE status determination. We recommend to perform non-invasive fetal RhD and RhCE genotyping in alloimunised Rh D negative pregnancies to evaluate the risk of haemolytic disease of the newborn and fetal sex determination in pregnancies at risk of X-linked disorders with a follow-up of invasive diagnostic procedures restricted to male fetuses only.

Key words
Fetal DNA, maternal plasma, real-time PCR, haemolytic disease of the newborn, X-linked disorders

Full text
(english)
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